NaCl在培養(yǎng)基中的作用

　　鈉離子不參與細(xì)胞的組成，但仍是微生物發(fā)酵培養(yǎng)基的必要成分，鈉離子與維持細(xì)胞滲透壓有關(guān)，故在培養(yǎng)基中常加入少量的鈉鹽，但用量不能過(guò)高，否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)。

　　氯離子在一般微生物中不具有營(yíng)養(yǎng)作用，但對(duì)一些嗜鹽菌來(lái)講是需要的，在一些產(chǎn)生含氯代謝物的發(fā)酵中，除了從其他天然原料和水中帶入的氯離子外，還需加入一定量的氯化物補(bǔ)充氯離子。

　　實(shí)驗(yàn)證明，在無(wú)機(jī)大量元素中，NaCl與維持細(xì)胞內(nèi)外滲透壓平衡，K2HPO4在培養(yǎng)基起緩沖劑調(diào)節(jié)pH值的作用，用量不能過(guò)高，否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)，一般用量在5％以內(nèi)。

　　在固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)，其實(shí)也是這個(gè)道理，細(xì)菌在利用基質(zhì)時(shí)能同時(shí)吸收NaCl，在體內(nèi)也能起到類似的作用即維持滲透壓的作用。

　　特別是有的嗜鹽菌，需要達(dá)到一定的鹽濃度才能激活體內(nèi)的某些酶才能生長(zhǎng)正常的。

　　培養(yǎng)基的配制：

　　1、配料：在容器中加入少量水，按照配方稱取各種藥品，加足所需水量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。

　　2、溶解：淀粉溶解：少量冷水調(diào)成糊狀，加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃ ，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

　　3、調(diào)PH：用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

　　4、過(guò)濾：濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。

　　5、分裝：一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

　　(1)三角瓶

　　若作靜置培養(yǎng)，則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，最多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養(yǎng)，則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。

　　(2)試管分裝

　　液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml，約試管的1/4高度。

　　固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml，約試管的1/5高度。

　　6、包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

　　7、滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞，培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

　　8、擺斜面：滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個(gè)斜面，約占試管長(zhǎng)度的1/2。

　　9、貯存：培養(yǎng)基在30℃下放置一天，無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。